如何在pubmed中设计QPCR引物

1、第一：在百度上搜索pubmed，会弹出home-pubmed-NCBI网页。点击进入该网页。

3、第三：第二步完成之后会弹出很多条目的引物，选择你要的引物的mRNA那个模块。点击进入查看。

5、第五：第四步挑选完成之后点击右上方的Pick Primers。

7、第七：完成步骤六后点击该网页最左下方的get primers。会弹出新网页，再点击新网页的check，即出现可供挑选的QPCR引物。

8、第八：根据QPCR引物的设计原则，我们需要挑选QPCR产物最短，温度最接近，GC越接近45%的，并且前导链和后随链的GC值都比较接近的，出现AT的数目不是很多的，并且引物特异性好，少存在转录变异副本之类的引物为最佳引物。